Товар с аналогичными характеристиками:
Описание
Смесь Phire Plant Direct Master предназначена для проведения ПЦР с использованием в качестве исходного материала непосредственно листьев и семян растений. Для проведения ПЦР не требуется предварительного выделения ДНК.
Смесь Phire Plant Direct Master представляет собой двукратный буферный раствор, содержащий термостабильную ДНК-полимеразу Phire Hot Start II (F-122S, F-122L) и каждый из дезоксирибонуклеозидтрифосфатов (dATP, dCTP, dTTP, dGTP). Финальная концентрация MgCl2 в реакционной смеси – 1,5 мМ. В состав смеси также входят реагент для поддержания плотности раствора и два красителя, позволяющие детектировать продукты ПЦР в геле непосредственно после реакции. Красители не препятствуют эффективному протеканию ПЦР и дальнейшим манипуляциям с ДНК, таким как анализ нуклеотидной последовательности, лигирование и гидролиз эндонуклеазами рестрикции. Однако при анализе продуктов ПЦР методами УФ-спектроскопии или флуоресценции рекомендуется использовать cмесь Phire Plant Direct (F-130) без красителей или выделять целевой ДНК-фрагмент.
Основной компонент смеси – ДНК-полимераза Phire Hot Start II. Фермент характеризуется пониженной «чувствительностью» ко многим ингибиторам ПЦР, обнаруженным в растениях. Он значительно эффективнее Taq-полимераз, используемых в ПЦР с «горячим стартом» (скорость элонгации цепи ДНК – 10-15 с на 1000 пар нуклеотидов), обладает в 2 раза более высокой точностью действия по сравнению с ними, стабилен, способен амплифицировать протяженные ДНК-фрагменты (до 7,5 пар нуклеотидов) с высоким выходом. Перечисленные свойства ДНК-полимеразы Phire Hot Start II обеспечиваются специально введенным в ее состав уникальным доменом, способным связывать двуцепочечную ДНК и увеличивающим процессивность действия фермента.
Термостабильная ДНК-полимераза Phire Hot Start II обладает незначительной корректирующей 3'-5'-экзонуклеазной активностью и не проявляет свойств 5'-3'-экзонуклеазы. В процессе реакции образуются фрагменты ДНК с «тупыми» концами.
Буфер для разбавления предназначен для обработки крупных или сложных образцов растений, например, содержащих волокна или латекс, в случаях, когда выполнение ПЦР без этой процедуры невозможно, когда требуется проведение мультиплексной ПЦР одного образца, амплификация длинных фрагментов ДНК (более 1000 пар нуклеотидов), повторные исследования.
Условия хранения: -20 °С. После размораживания буфер для разбавления можно также хранить при +4 °С.