Описание
Thermo Scientific T-PER Tissue Protein Extraction Reagent обеспечивает мягкую экстракцию общего белка из образцов тканей.
Особенности T-PER Tissue Protein Extraction Reagent:
- Простая процедура - просто гомогенизируйте образец ткани в соотношении 1:20 (w/v) ткани и реагента T-PER, затем центрифугируйте для гранулирования клеток или остатков ткани.
- Мягкий и удобный - детергент поддается диализу для быстрого и легкого удаления; может использоваться с дополнительными компонентами (например, ингибиторами протеаз, солями, восстановителями, хелатирующими агентами и т.д.).
- Гибкость - лизат можно использовать для репортерных анализов, анализов протеинкиназы, иммуноанализа и/или очистки белка
- Совместимость - лизат совместим со стандартными белковыми анализами, такими как Pierce Coomassie Plus (Bradford) Protein Assay
Этот реагент для лизиса клеток тканей использует запатентованный детергент в 25мМ бицине, 150мМ хлориде натрия (pH 7.6) для максимальной эффективности солюбилизации белка из образцов тканей млекопитающих путем гомогенизации. Простой состав совместим с такими добавками, как ингибиторы протеаз, соли, восстановители, хелатные агенты, что обеспечивает универсальность для различных типов образцов и приложений лизиса. Клеточные лизаты, приготовленные с помощью T-PER Reagent, непосредственно совместимы с репортерными анализами (например, люцифераза, бета-галактозидаза, хлорамфеникол ацетилтрансфераза), анализами протеинкиназ (например, PKA, PKC, тирозинкиназа), иммуноанализами (например, вестерн-блотами, ELISA, RIA) и/или процедурами очистки белков.
Однородное и эффективное выделение тканевых белков из различных образцов является сложной задачей из-за различий в составе тканей и методах выделения. Волокнистые и коллагеновые ткани, такие как сердце и почки, делают экстракцию белка методами замораживания-размораживания или ступки и пестика неэффективной без использования детергента. И наоборот, мягкие ткани, такие как селезенка и печень, требуют более мягкого протокола экстракции для получения оптимальных результатов. Реагент T-PER был разработан для использования со всеми тканями, независимо от методов механической экстракции. Мягкое моющее средство улучшает солюбилизацию белков, не нарушая их функции, а нейтральный pH и концентрация соли в этом реагенте позволяют более эффективно экстрагировать белки из клеточных компартментов, получая однородные лизаты.
Реагент T-PER был проверен на выход белка как в свежей, так и в замороженной ткани. Протоколы экстракции замороженных тканей и замораживания-размораживания предсказуемо привели к более высокому выходу белка. Кроме того, показано, что T-PER Reagent эффективно выделяет целевые белки из различных клеточных компартментов, таких как плазматическая мембрана (Na-K+ АТФаза, пан-кадхерин), цитоплазма (HSP90, MAPK), митохондрии (COXIV) и ядро (HDAC1), а также тканеспецифические маркеры из мозга (синаптофизин) и сердечной ткани (сердечная изоформа тропонина T).